腺病毒上清感染使用说明书-其它资料-资讯-生物在线

腺病毒病毒上清感染细胞的方案

第一天 目的细胞铺板(以24孔板为例)

将细胞状态良好的目的细胞(293T细胞为例)，用0.25%胰酶消化下来，把细胞浓度调整为3.0*10⁵cells/孔接种于24孔板，按500ul/孔培养基加入。

接种目的细胞的数量因细胞生长速度而有所不同，一般保证在第二天进行病毒感染时细胞汇合度达到90%～95%之间为宜。

第二天 病毒感染

1 计算所要添加的病毒量

V（ml）=MOI*细胞数量/病毒滴度

以MOI=5，细胞数为3.0*10⁵cells，病毒的滴度1.5*10⁸ifu/ml为例

所需要加的病毒的体积为：

V=5*3.0*10⁵cells/1.5*10⁸

= 1*10^-2ml

备注：如果所加的病毒量低于2.0ul时，则需要稀释病毒原液后，再加病毒液体。

2 病毒感染

取出24孔板中旧培养基，加入无血清的含有所需要病毒量的培养基500ul（400ul+100ul稀释的病毒液体）。

3 换液

感染实验同一天，2h后，弃去上清，换成10%血清的培养基，500ul/孔。

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