引 言
荧光素酶报告基因检测试剂，作为药物研发中不可或缺的核心工具，以其实时监测基因表达和信号传递的能力，在高通量筛选、药效评估和靶点验证等关键环节中扮演着至关重要的角色。这一技术的应用显著提高了药物筛选和评估的效率，加速了新药的发现和开发过程。
荧光素酶报告基因检测原理
荧光素酶报告基因检测技术通过荧光素酶催化luciferin氧化成oxyluciferin并产生生物荧光，实现对萤火虫荧光素酶活性的定量分析。该技术在miRNA靶基因验证、启动子转录活性调控等领域具有重要应用价值。通过将目标基因的调控元件插入荧光素酶基因的上下游，构建荧光素酶报告质粒，可以转染细胞并进行相应的刺激或处理。随后，通过裂解细胞并测定荧光素酶活性，可以评估不同刺激条件下调控元件的活性变化，从而深入理解基因表达的调控机制。
单荧光素酶和双荧光素酶检测应用的差异
关于报告基因检测，主要分为单荧光素酶报告基因检测及双荧光素酶报告基因检测，具体应用中，怎么知道自己的实验是用单荧光素酶还是双荧光素酶检测系统呢?下面我们看一下两者的差异。
单荧光素酶报告基因检测系统
报告基因数量：萤火虫荧光素酶单一报告基因；
转染类型：单个报告基因质粒，转染后通过药物筛选，构建稳定表达荧光素酶的报告基因细胞株；
检测流程：仅需检测萤火虫荧光素酶信号，操作简单，检测周期短，适合高通量药物筛选使用；
应用场景分析：一般是通过构建稳定过表达单克隆细胞株，因为细胞株的表达量比较稳定，均一，不存在因转染效率及细胞活率等变异情况对实验的影响。并且操作简单，由于只检测萤火虫信号，所以数据分析更加便捷，再加上检测时间短等优势，特别适合高通量药物筛选，满足大规模样本检测的需求。
双荧光素酶报告基因检测系统
报告基因数量：萤火虫荧光素酶+海肾荧光素酶双重报告基因；
转染类型：两个报告基因质粒共转染，主要是通过瞬时转染；
检测流程：需要先检测萤火虫再检测海肾信号，两者的比值（Firefly/Renilla）用于最终的数据计算；
应用场景分析：一般是通过瞬时转染，通过共转染含有海肾荧光素酶基因的质粒作为内参，为实验提供一个基准线，从而减少细胞活性和转染效率等外在因素的干扰，通过比值计算，可以校正细胞数量、转染效率和细胞活性的变异，提高实验结果的准确性。是研究基因表达调控、信号传导途径和药物筛选等领域的重要工具。
系列产品
翌圣荧光素酶报告基因检测系列产品提供简便、高效的定量检测方案。单一组分设计简化了使用流程，高灵敏度与5小时超长信号半衰期的完美结合，满足大规模药物筛选检测需求。我们提供Bio-One Step、Steady-One Step和Bright-One Step三种产品，以适应不同灵敏度和稳定性需求。
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产品名称 |
Bio-One Step |
Steady-One Step |
Bright-One Step |
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产品货号 |
11411ES |
11404ES |
11412ES |
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应用场景及特性 |
本试剂盒在信号强度与稳定性之间做到了相对平衡。即保持了相对较高的信号强度，又在一定的时间内保持信号强度的相对稳定。 |
半衰期可持续5 h以上。尤其在前2 h发光值变化较小。适合于超高通量或384孔板检测。 |
高灵敏度，高信号强度。适合于对灵敏度有较高要求的实验。 |
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信号半衰期 |
60 mins |
5 h以上 |
30 mins |
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操作特点 |
一步法 |
一步法 |
一步法 |
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上机等待时间 |
10 mins内信号基本没有变化 |
40 mins内信号基本没有变化 |
5 mins内信号基本没有变化 |
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产品优势
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信号半衰期久：信号半衰期最高可达5h，满足高通量实验需求，避免样本量多导致的首尾孔因时间差引起的信号差异，保证结果更加稳定可靠。
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荧光信号强：信号值可达8次方，检测窗口大，为早期药物筛选和药效评估提供了强有力的数据支持。
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操作方便：一步法操作，避免繁琐的实验流程，直接加入检测试剂，等待5mins 即可上机检测。
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多种选择：根据应用场景不同，提供了3款不同产品，可根据实验对信号值、信号稳定性的需求进行选择。
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产品数据
01
翌圣不同报告基因检测试剂性能比较
在稳定过表达萤火虫荧光素酶的细胞株上进行三种类型检测试剂的验证，结果显示，Bright-One Step产品拥有更高的信号值；Steady-One Step产品信号半衰期更久，信号更稳定；Bio-One Step产品拥有高信号值的同时还保持较长的信号半衰期。
图1. 翌圣不同报告基因检测试剂性能比较
02
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂和竞品比较
在稳定过表达萤火虫荧光素酶的细胞株上使用翌圣Bio-One Step、竞品P和竞品V同时检测，结果显示，翌圣Bio-One Step产品信号值及信号半衰期和竞品P基本保持一致，信号半衰期优于竞品V。
图2. 翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂和竞品比较
03
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂反复冻融测试
翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂经过反复冻融实验，结果显示即使经过5次冻融循环，产品性能依然保持稳定，无显著变化。
图3. 翌圣Bio-One Step荧光素酶报告基因检测试剂反复冻融测试
操作流程
01 细胞处理
直接在细胞悬液中加入试剂后用枪头吹打5次，等待5 mins，使细胞充分裂解。
02
上样
每孔吸取100 μL混合液（检测试剂+细胞培养基）到检测板。
03
荧光检测
设置酶标仪参数。将检测板放入酶标仪，震动几秒，检测即可。
产品清单
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产品类别 |
产品名称 |
产品货号 |
产品规格 |
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单荧光素酶报告基因检测试剂 |
Bio-One Step Luciferase Assay Kit Bio-One Step 萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/10×100T/1000T |
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Steady-One Step Luciferase Assay Kit Steady-One Step 萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T /10×100T |
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Bright-One Step Luciferase Assay Kit Bright-One Step萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/10×100T/1000T |
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双荧光素酶报告基因检测试剂 |
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T |
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Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit 辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒 |
100T/1000T |