WH-4-023

MCE 国际站：WH-4-023

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-12299

CAS：837422-57-8

Synonyms：Dual LCK/SRC inhibitor

纯度：99.75%

存储条件：Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 2 years -20°C 1 year

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：WH-4-023 是一种有效的选择性的 Lck/Src 抑制剂，IC50 分别为 2 nM/6 nM，对p38α 和 KDR作用效果稍弱。

体外：WH-4-023 在 Lck 上表现出与 2-取代变体类似的效力增加[1]。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

细胞实验：该检测的目的是测试 T 细胞受体 (TCR；CD3) 和 CD28 信号通路抑制剂在人类 T 细胞中的效力。从人外周血淋巴细胞 (hPBL) 中纯化 T 细胞，在 96 孔组织培养板 (1×105 T 细胞/孔) 中用抗 CD3 和抗 CD28 抗体组合刺激之前，用或不用化合物预孵育。细胞在 37°C 下 5% CO2 培养约 20 小时，然后通过细胞因子 ELISA 定量上清液中分泌的 IL-2。然后用 3H-胸苷对孔中剩余的细胞进行脉冲过夜，以评估 T 细胞增殖反应。将细胞收获到玻璃纤维过滤器上，并通过液体闪烁计数器分析 3H-胸苷掺入 DNA 的情况。为了进行比较，佛波醇肉豆蔻酸 (PMA) 和钙离子载体联合使用，以诱导纯化 T 细胞分泌 IL-2。测试潜在的抑制剂化合物对该反应的抑制作用，如上文针对抗 CD3 和 CD28 抗体所述。以与上述类似的方式进行人类全血抗 CD3/CD28 诱导的 IL-2 分泌试验，使用正常志愿者的全血在刺激前在组织培养基中稀释 50%[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：Lck HTRF 激酶测定涉及在存在或不存在抑制剂化合物的情况下对胃泌素的生物素化底物肽进行 ATP 依赖性磷酸化。胃泌素的最终浓度为 1.2 μM。ATP 的最终浓度为 0.5 μM（Km app =0.6±0.1 μM），Lck（GST-激酶域融合（AA 225−509））的最终浓度为 250 pM。缓冲液条件如下：50 mM HEPES pH=7.5、50 mM NaCl、20 mM MgCl2、5 mM MnCl2、2 mM DTT、0.05% BSA。用 160 μL 检测试剂淬灭并终止测定。检测试剂如下：缓冲液由 50 mM Tris、pH=7.5、100 mM NaCl、3 mM EDTA、0.05% BSA、0.1% Tween20 组成。读数前，加入链霉亲和素异藻蓝蛋白 (SA-APC)，测定浓度为 0.0004 mg/mL，以及欧拉化抗磷酸酪氨酸抗体 (Eu-anti-PY)，测定浓度为 0.025 nM。在 Discovery 荧光板读数器中读取测定板，激发波长为 320 nm，发射波长为 615 和 655 nm[1]。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

参考文献：

[1]. Martin MW, et al. Novel 2-aminopyrimidine carbamates as potent and orally active inhibitors of Lck: synthesis, SAR, and in vivo antiinflammatory activity. J Med Chem. 2006 Aug 10;49(16):4981-91.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。