百萤- 用于染色DNA和RNA的有力工具------羟芪巴脒(Fluoro Gold)-自主发布-资讯-生物在线

百萤- 用于染色DNA和RNA的有力工具------羟芪巴脒(Fluoro Gold)

作者:西安百萤生物科技有限公司 2023-11-24T00:00 (访问量:33502)

一、百萤 羟芪巴脒*DNA和RNA染料*简介

 

羟芪巴脒(也称为Fluoro Gold)用于染色DNA和RNA。与RNA相比,当与DNA结合时,它表现出明显不同的荧光发射谱。该阳离子染料也经常用作逆行神经元示踪剂。

图1.羟芪巴脒*DNA和RNA染料*的化学结构

 

二、百萤 羟芪巴脒*DNA和RNA染料*参数

 

Ex(nm)        358

Em(nm)        433

分子量        472.54

溶   剂       Water

存储条件     在-15℃以下保存,避光防潮

CAS          223769-64-0

外观         黄色粉末

 

三、百萤 羟芪巴脒*DNA和RNA染料*实验方案

染色细胞示例

 

羟芪巴脒的使用与其他荧光示踪剂基本相同。主要区别在于Fluoro-Gold在注射后存活时间,浓度范围,组织和与其他组织化学技术的兼容性方面更灵活。 它比大多数其他荧光示踪剂更耐褪色,更亮和荧光时间更长。

1.染料浓度:建议使用1至10%羟基芪脒。初,建议浓度为4%。如果在注射部位发生坏死,或标记太强,则将浓度降低至2%溶液。

2.染料管理:

2.1压力注入 - 注射的体积范围为0.05-1μl,通常为0.1-0.2μl。

2.2结晶 -可以从微量移液管的施用示踪剂的晶体。

3.固定剂:可以使用任何固定剂或不使用固定剂,但常使用含有4%甲醛的PBS。含有高浓度重金属(如锇,汞)的固定剂会淬灭荧光,而高浓度(超过1%)的戊二醛可能会增加背景荧光。

4.组织化学处理:含有羟基芪脒的组织可以根据几乎任何常见的组织学技术进行处理。常使用固定组织的冷冻切片。

5.适用实验:可以进一步处理切片用于第二标记,例如放射自显影,HRP组织化学,免疫细胞化学,第二荧光示踪剂,荧光复染剂等。

6.固定、覆盖:通常将切片安装在涂有明胶的载玻片上,风干,浸入二甲苯中,并用非荧光DPX塑料封固剂盖上盖玻片。切片可以用分级醇脱水,除非这与第二示踪剂不相容。如果将羟基噻嗪与荧光免疫细胞化学组合,则将切片风干并直接用DPX盖上盖玻片。

7.照相:使用宽带紫外激发滤光片(激发 -  323nm,发射 - 中性pH为620nm),用荧光显微镜观察羟基芪脒。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色,而当用酸性(例如PH3.3)pH缓冲液处理组织时发出蓝色。它可以用数码或胶片拍摄(使用Ektachrome 200-400 ASA胶片进行彩色打印,使用可比较的速度胶片进行黑白打印)。大多数曝光时间范围为10-60秒曝光,具体取决于物镜放大倍数和标记强度。三十(30)秒的暴露是平均的。可以利用多次暴露来同时显现羟基噻嗪和另一种示踪剂。因此,UV将与明场照明相结合,以在放射自显影中同时定位具有HRP或银颗粒的Fluoro-Gold。类似地,蓝光激发可以组合以也可视化FITC的绿色发射颜色,而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭(荧光复染剂)的红色发射颜色。

 

图2.羟芪巴脒*DNA和RNA染料*实验光谱图

西安百萤生物科技有限公司 商家主页

地 址: 西安市高新区草堂科技产业基地秦岭大道西6号科技企业加速器二区9幢2单元20401号房

联系人: 第五经理

电 话: 029-68064558

传 真: 029-68064558

Email:info@tjbiolite.com;zx@tjbiolite.com

相关咨询
ADVERTISEMENT